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【烈冰智造】自动化解离仪所得细胞总数远超传统,从源头锁定数据可靠性! 时间:2025-03-20

【烈冰智造】自动化解离仪所得细胞总数远超传统,从源头锁定数据可靠性!

      在单细胞测序技术飞速发展的今天,组织解离环节仍是制约数据质量的隐形瓶颈。传统水浴锅解离存在温度漂移、批次效应、样本污染等难以克服的弊端,基于以上原因,烈冰强势推出了具有恒温加热模组的单管封闭式自动化解离仪器

实验目的

本次测试实验以小鼠乳腺癌肿瘤组织为样本,为验证烈冰自动化单细胞组织解离设备的性能优势,在其获得悬液质量、细胞质控参数以及细胞类型等方面与传统水浴锅解离进行了详细比较。

实验流程

首先将获取到的小鼠乳腺癌肿瘤组织剪碎到1-2mm³,加入解离试剂,应用自动化解离仪器进行组织消化;然后,及时中止消化反应,将细胞悬液通过70μm滤网于50ml管中,离心去上清获得细胞沉淀;通过红细胞裂解液去除残留的成熟红细胞;随后,通过2-3轮离心,清洗并回收高质量细胞;最后,对单细胞悬液进行质检,确定细胞活性、数量及背景情况。

悬液质检

自动化解离仪:细胞活性86.91%,细胞数50万

传统水浴锅解离:消化质检结果:细胞活性89.26%,细胞数38万

在同一实验人员、相同组织大小的条件设置下,烈冰自动化解离可获得更多的细胞总数,同时维持了高质量的细胞活率。

数据结果

采用烈冰CytoNavigator单细胞数据分析系统,对应用自动化解离仪与传统水浴震荡法组织解离所得的数据结果进行详细对比分析:

细胞质控

获取细胞数量更多自动化解离的捕获细胞数为7,706,高于传统水浴解离的6,488。

基因组比对率更高:基因组比对率指标中,烈冰自动化解离高达99.00%,高于传统水浴解离的 97.45%。

细胞类型鉴定

特定细胞类型富集优势烈冰自动化解离结果中,上皮细胞计数占比达34.3%,显著高于传统水浴解离的15.9%;周细胞占比3.3%,同样高于传统水浴解离方案。整体来说,自动化解离的非免疫类细胞整体占比89.7%,高于传统水浴解离方案86.9%,表明其在非免疫细胞的整体解离效率上更具优势,能保留更多非免疫细胞。

主要结论

  在本次测试中,采用相同组织对比了烈冰自动化以及传统水浴解离在获得悬液质量、细胞质控参数以及细胞类型上的差异,详情如下:

1、在细胞悬液质量方面,烈冰自动化解离仪相较于传统水浴锅解离,获得的单细胞悬液细胞总数更多的同时活性良好。

2、在细胞质控方面,烈冰自动化解离获取细胞数量更多,基因组比对率更高。

3、在细胞类型方面,烈冰自动化解离在上皮和内皮细胞高于传统水浴解离方案。整体上,自动化解离的非免疫类细胞占比89.7%,高于传统水浴解离方案86.9%,表明其在非免疫细胞的整体解离效率上更具优势,能保留更多非免疫细胞。

传统水浴震荡法:

传统的组织解离消化方法主要是通过水浴锅震荡的方式实现,可能出现以下问题:

1.消化均匀性有偏差:震荡消化可能无法保证组织样本在水浴锅中均匀受热,导致消化不彻底或过度消化。

2.温度控制不精确:水浴锅可能难以提供精确的温度控制,导致消化过程中温度波动,影响酶的活性和细胞的完整性。

3.存在潜在的交叉风险:在多次消化过程中,使用相同的水浴锅可能会增加样本间交叉污染的风险。

4.可能存在实验批次效应:由于依赖于操作者的经验和技巧,传统方法难以实现操作的标准化,这可能导致实验结果的批次间差异。

烈冰智造自动化组织解离仪

相比之下,烈冰自动化组织解离仪可以有效克服这些不足,提高实验的效率和结果的可靠性。产品核心优势主要有


1、波轮与样本非硬挤压解离模式

使得组织所受的机械压力最小化,从而保护了细胞的完整性和活性。同时正置旋转技术确保了样本在消化过程中的均匀受力,适用于各类软硬组织。

2、精准温控

金属浴模块实现精准温控,迅速散热,确保细胞活性,这一功能对于温度敏感的细胞类型尤为重要,能够有效避免温度波动对细胞功能和完整性的不利影响。

3、交叉污染风险低

一次性耗材的使用显著降低了交叉污染风险,确保了实验结果的精准可靠。

4、实验批次效应小

仪器可提供高度一致的消化效果,减少了实验批次间的变异,保证了数据的一致性和可比性。

5、多样化消化方案

针对不同组织类型的定制化消化方案,以适应各种组织的特性,从而提升实验效率,确保样本处理的一致性和结果的准确性。