小鼠肺、小肠组织不同消化解离方式对比实验
产品的应用离不开大量出色数据的支持,烈冰在精进研发的道路上从未停下脚步。本次测试实验对小鼠肺、小肠组织进行同步处理,应用烈冰智造自动化组织解离仪与传统水浴震荡法进行对比实验,以揭示两种技术在组织解离效果上的差异、比较肺和小肠组织的各环节差异。
本次测试实验除正常绿豆粒大小(后称“大组织”)的样本组织量外,同时模拟了穿刺样本组织量(后称“小组织”),以多维度比较小鼠肺、小肠组织消化的各环节差异:不同消化解离方式的差异,不同组织大小样本量的消化效果差异。
1、比较肺/小肠组织内皮比例是否有所提升?(大组织样本上机测序)
内皮细胞形成血管的内壁,薄而光滑且坚韧,是血管管腔内血液及其他血管壁(单层鳞状上皮)的接口。
2、不同组织大小的细胞数是否存在区别?
①Lung-S-A(肺-小组织-自动)
②L-B-A(肺-大组织-自动)
③L-S-M(肺-小组织-手动)
④L-B-M(肺-大组织-手动)
⑤Small Intestine-S-A(小肠-小组织-自动)
⑥SI-B-A(小肠-大组织-自动)
⑦SI-S-M(小肠-小组织-手动)
⑧SI-B-M(小肠-大组织-手动)
大组织(大组织块)10min质检一次,共消化解离三轮-30min
小组织(模拟穿刺)10min质检一次,共消化解离两轮-20min
一、样本准备(酶试剂称取、组织样本分组)
二、组织剪碎(组织颗粒化、增大接触面积)
三、消化解离
加入消化液:小组织5ml、大组织10ml
【烈冰智造】自动化组织解离仪
VS
传统水浴震荡法
四、单细胞悬液初步质检(直接吸取未经离心清洗的悬液质检)
初步质检结果对比,观察烈冰智造自动化组织解离仪与传统水浴震荡法初步组织消化效果,并比较其差异及大小组织间的差异。
样本名称
自动(A)
手动(M)
细胞活率
细胞总数
细胞活率
细胞总数
肺-模拟穿刺
100%
59W
97.78%
33.9W
肺-大组织块
97.22%
597W
97.03%
304W
小肠-模拟穿刺
96.43%
423W
98.45%
194.5W
小肠-大组织块
94.94%
1760W
93.82%
829W
以上结果可以观察到,应用烈冰智造自动化组织解离仪进行初步消化的组织细胞活率更高、细胞总数更多。
五、过筛
由上图可以看出经过烈冰智造自动化组织解离仪进行组织消化后,碎片、杂质非常少,过筛情况显著优于传统水浴震荡法。
六、离心、裂红(肺组织裂红、小肠清洗一次)
七、再次离心、清洗(清洗两次,重悬+离心)
八、单细胞悬液终检
符合上机标准,大组织样本上机测序
清洗后
自动(A)
手动(M)
细胞活率
细胞总数
细胞活率
细胞总数
肺-模拟穿刺
94.07%
178W
93.9%
185.5W
肺-大组织块
94.41%
205W
97.1%
172W
小肠-模拟穿刺
93.73%
144.5W
88.33%
169.5W
小肠-大组织块
85.61%
340W
89.18%
292W
应用烈冰智造自动化组织解离仪进行消化的小鼠肺、小肠小组织细胞活率、大组织细胞总数高于传统水浴震荡法。这一结果不仅验证了自动化组织解离仪在温和高效地消化组织方面的优异表现,也突显了其高样本回收率的优势。
【烈冰智造】自动化组织解离仪
烈冰智造自动化组织解离仪可将各类组织快速、彻底的解离为高质量的单细胞悬液。仪器的金属浴模块提供了精准温控,螺旋桨式搅拌头提供了柔和且稳定的剪切力,相较于传统方法,解离效率大幅提升。
产品核心优势主要有:
1.波轮与样本非硬挤压解离模式:使得组织所受的机械压力最小化,从而保护了细胞的完整性和活性。同时正置旋转技术确保了样本在消化过程中的均匀受力,适用于各类软硬组织。
2.精准温控:金属浴模块实现精准温控,迅速散热,确保细胞活性,这一功能对于温度敏感的细胞类型尤为重要,能够有效避免温度波动对细胞功能和完整性的不利影响。
3.交叉污染风险低:一次性耗材的使用显著降低了交叉污染风险,确保了实验结果的精准可靠。
4.实验批次效应小:仪器可提供高度一致的消化效果,减少了实验批次间的变异,保证了数据的一致性和可比性。
5.多样化消化方案:针对不同组织类型的定制化消化方案,以适应各种组织的特性,从而提升实验效率,确保样本处理的一致性和结果的准确性。